Çözünmüş oksijen sensörlerinin doğru kalibrasyonu, hem span (üst nokta) hem de sıfır nokta (zero point) kalibrasyonunu içerir. %20,95 oksijen konsantrasyonuna sahip hava, span kalibrasyonu için uygun bir ortam sağlarken; sıfır nokta kalibrasyonu daha karmaşık olabilir. Hamilton, doğru bir sıfır nokta kalibrasyonu için iki farklı standart önermektedir. Aşağıda verilen detaylar, hem polarografik hem de optik oksijen sensörleri için geçerlidir.
Azot Gazı Kullanılarak Sıfır Nokta Kalibrasyonu
Azot gazı, sıfır nokta kalibrasyonu elde etmek için en yaygın kullanılan yöntemlerden biridir. Yüksek saflıkta azot (Grade 5.0), %99,999 veya daha yüksek saflık sertifikasına sahip olacak şekilde kullanılmalıdır. Olası safsızlıklar nedeniyle farmasötik kalite azot (%99,5) kullanılmamalıdır.
Azot gazı genellikle yüksek basınçlı tüpler halinde temin edilir; bu nedenle akışı yönlendirmek için bir gaz regülatörü ve hortum gereklidir. Düşük geçirgenlikleri nedeniyle paslanmaz çelik borular veya poliamid / poliüretan gibi plastik hortumlar önerilir.
Sensör kalibrasyonu tercihen laboratuvar ortamında yapılmalıdır. Hamilton, bu amaç için ideal olan bir Kalibrasyon İstasyonu (Ref 243575) üretmektedir; ancak geleneksel bir akış hücresi (flow cell) de kullanılabilir. Azot gazı akışı, kalibrasyon istasyonunun girişine yaklaşık 0,5 L/dakika olacak şekilde kontrol edilmelidir. Sensör ucunda geri basınç oluşmaması için kalibrasyon istasyonunun çıkışı atmosfere açık olmalıdır.
Sıfır nokta kalibrasyonuna başlamadan önce, sensör üzerinden en az 5 dakika boyunca azot gazı geçirilmelidir. Bu işlem, hortum içindeki tüm artık oksijenin tamamen uzaklaştırılmasını sağlar.
Hamilton Kalibrasyon İstasyonu (Ref 243575), laboratuvar ortamında sensörlerin gaz ile kalibrasyonu için kullanımı kolay bir düzenek sunar.
Sıvı Standart Kullanılarak Sıfır Nokta Kalibrasyonu
Gaz ile kalibrasyonun mümkün olmadığı durumlarda, basit bir sıvı çözelti de kullanılabilir. 1 gram sodyum sülfit (Na₂SO₃), 100 mL distile su ile karıştırılır. Mevcutsa, çözeltiye 1 miligram kobalt klorür (CoCl₂) eklenebilir. Sodyum sülfit bir oksijen tutucu (scavenger) olduğundan, sudaki çözünmüş oksijeni 15 dakika içinde uzaklaştırır. Kobalt klorür ise reaksiyon için bir katalizör görevi görür ve eklendiğinde çözeltinin birkaç dakika içinde kullanıma hazır olmasını sağlar.
Kalibrasyon, DO sensör ucunun sıvı standart içerisine daldırılmasıyla gerçekleştirilir. Sıfır nokta kalibrasyonuna başlamadan önce, sensör üzerinde herhangi bir artık hava kabarcığı bulunmadığından emin olunmalıdır. Kalibrasyon tamamlandıktan sonra çözelti hava geçirmez bir kapta saklanmalı ve 7 gün boyunca tekrar kullanım için uygun olacaktır.